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      半貼壁半懸浮細胞傳代

      日期:2022-09-04 08:22
      瀏覽次數:45
      摘要: 半貼壁半懸浮細胞傳代(以一個T25瓶為例) 1、 培養液(含懸浮的細胞):用移液器吸出培養液轉移到無菌離心管中; 2、 貼壁部分:用1ml PBS洗細胞,吸出PBS放入到第1步裝有培養液的離心管中收集(不要直接丟棄,里面有細胞); 3、 培養瓶加入胰酶1ml,放入培養箱靜置消化; 4、 消化時間跟據細胞特性有所不同,顯微鏡下看到細胞明顯收縮變圓,側立培養瓶細胞可以滑落時可終止消化,全程不要拍打培養瓶; 5、 用3ml含血清的培養基終止消化,將消化下來的細胞懸液吹散細胞后收集...

      半貼壁半懸浮細胞傳代(以一個T25瓶為例)

      1、 培養液(含懸浮的細胞):用移液器吸出培養液轉移到無菌離心管中;

      2、 貼壁部分:用1ml PBS洗細胞,吸出PBS放入到第1步裝有培養液的離心管中收集(不要直接丟棄,里面有細胞);

      3、 培養瓶加入胰酶1ml,放入培養箱靜置消化;

      4、 消化時間跟據細胞特性有所不同,顯微鏡下看到細胞明顯收縮變圓,側立培養瓶細胞可以滑落時可終止消化,全程不要拍打培養瓶;

      5、 用3ml含血清的培養基終止消化,將消化下來的細胞懸液吹散細胞后收集到第1步的離心管;

      6、 將離心管在1200rpm(約250g) 3min離心,離心完畢棄掉上清,加入新的培養基重懸,按實際情況分瓶,放入培養箱培養。


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